novice1

Ločevanje podenot trombinu podobnega encima agapurina iz strupa Agkistrodon halys in določanje zaporedja aminokislinskih ostankov

[Povzetek] Cilj Določiti N-terminalne 15 aminokislinske ostanke dveh podobnih podenot agakutina.Dve podenoti encimske molekule je treba razdeliti, da dobimo enojno peptidno verigo podenote, in jo sekvencirati.Metode Visoko prečiščen agakutin smo pridobili z biokemijsko metodo.Vzorci posameznih podenot za identifikacijo in sekvenciranje so bili pripravljeni z ločevanjem elektroforeze SDS-PAGE, zbiranjem lepilnega traku podenote in tehnologijo elektroprenosa PVDF membrane.Slednji je določil 15 aminokislinskih ostankov na N-terminalu podenote z Edmanovo degradacijsko metodo.Rezultati Zaporedje velike podenote (16 kDa) je bilo DCSSGWSSYEEHQYY, zaporedje male podenote (15 kDa) pa DSSGWSSYEGHEYYV.Zaključek Rezultati sekvenciranja so pokazali, da je bil agakutin nov encim, podoben kačjemu strupu, trombinu, s pomočjo iskanja v bazi podatkov NCBI.


Čas objave: 22. december 2022